bv2細胞是小鼠小膠質細胞，用于測試這些小兒HGG細胞激活小膠質細胞腫瘤支持表型的能力，是組蛋白H3野生型并表達大量的H3K27的三甲基化形式，以及其乙酰化形式?？梢杂^察到DIPG腫瘤是由H3-K27M陽性和陰性的細胞混合組成的，H3K27me3和H3K27ac的表達水平不一樣。對三個不同DIPG患者的腫瘤組織進行的免疫組化分析證實，DIPG癌細胞為H3-K27M陽性，而其微環(huán)境中表達IBA1的小膠質細胞不攜帶該突變。我們表明，與它們的組蛋白H3狀態(tài)無關，即不論是野生型H3還是H3-K27M突變型，小兒HGG細胞都能夠使BV2小膠質細胞向腫瘤支持型極化，這表現(xiàn)在它們能夠支持HGG癌細胞對基質的入侵能力。
 

　　接下來，我們檢查了一氧化氮合酶-2（Nos2）基因的表達，因為其表達的誘導與小膠質細胞的促炎癥表型有關，而其表達在暴露于膠質瘤被大幅抑制。膠質瘤細胞甚至可以有效地減少LPS誘導的小膠質細胞中NOS2的表達。因此，通過抑制Nos2基因的表達進一步說明了小膠質細胞腫瘤支持表型的獲得，該基因編碼誘導型一氧化氮合酶，是小膠質細胞極化為免疫抑制和促進腫瘤激活狀態(tài)的分子特征。
 

　　在bv2細胞中對H3K27me3和乙?；疕3K27（H3K27ac）富集的染色質免疫沉淀（ChIP）進行了分析。事實上，Nos2啟動子上的H3K27me3數量明顯減少，這反映了一個轉錄更活躍的基因位點。同時，與siCtrl相比，在siEzh2小膠質細胞中觀察到H3K27ac的富集，這與更高的轉錄激活有關，盡管并不明顯。接下來，我們調查了有效的抗腫瘤細胞因子ll1b的表達，發(fā)現(xiàn)在與H3.3野生型SF188腫瘤細胞、H3-K27M SF8628或第二個患者衍生的DIPG細胞系SU-DIPG-XIII共培養(yǎng)時，這種細胞因子在小膠質細胞中沒有被誘導然而，我們發(fā)現(xiàn)siEzh2小膠質細胞表達的Il1b水平升高，即使與SF188腫瘤細胞共培養(yǎng)，Il1b水平仍保持不變。為了進一步證實Il1b可能是H3K27me3的重要靶點，我們用炎癥源脂多糖(LPS)治療siEzh2小膠質細胞。